胚胎著床前染色體快篩最新技術展pgs聖地牙哥妙恩的最新論文munne 全美有150個胚胎基因醫學部門可以分析胚胎染色體， 總共完成兩萬個試管嬰兒胚胎切片， 可以用array CGH來看24個染色體， 也可以用螢光原位雜交染色法，也可以qPCR或SNP或NGS來看基因疾病， 染色體異常在胚胎非常常見， 比如說35~37歲，看起來非常好的囊胚居然有56%是染色體不正常的， 更別講說超過41歲，看起來非常優的胚胎有80%是染色體不正常的， 可以說染色體不正常在胚胎不管好壞， 都是司空見慣，當然胚胎發育停頓， 在35~37歲這個族群，有75%是染色體異常， 基本上胚胎的外觀越不好，染色體不正常比例越高，所以胚胎著床前基因診斷， 是基於： 1.它可以挑出染色體異常， 2.增加試管嬰兒成功率、著床率、活產率， 根據大量的研究發現，PGS對於不孕症有可以找出胚胎染色體異常的好處， 對於第三天胚胎切片使用FISH有爭議， 1.第三天胚胎切片有相鑲， 2.你說它胚胎不正常，有時候它會自己修復，變成好胚胎，也就是它會自己修復， 3.第三天胚胎切片會傷害胚胎，會讓胚胎受傷， 第三天胚胎切片會相鑲 大家都知道，因此你會造成告訴病人胚胎正常， 但它是不正常的，很容易會有誤診，說到修復的能力， 其實在美國發現第三天第15對染色體三套體 它修復的能力其實只有0.56%，不高， 所以有一份研究證實，你做胚胎切片，外胚層異常，胎兒本身其實是正常，也就是胎盤本身是異常，可是胎兒本身染色體是正常，換句話說:胎兒是胎兒，胎盤是胎盤， 第三天的胚胎切片會造成胚胎的毀損，會減少著床率， 有一份研究發現，它一切片下去會影響著床率大概39%， 在第三天胚胎切片診斷錯誤率，有人說高達50%， 2005年有一篇說70%，也就是說第三天胚胎切片你跟人家講正常， 其實講錯話、錯誤診斷高達50%， 當然是要不得的，非常高的比例， 後來在2010年有人用array CGH，它的錯誤率才降到1.8%， 所以如果用FISH看9個染色體，錯誤率是3.7%， 所以第三天胚胎切片用比較先進的array CGH去檢查，其實錯誤率不到2%， 那最新的染色體胚胎切片分析是 1.看24個染色體， 2.第五天胚胎切片，並且冷凍等報告，目前分析胚胎的方法有SNP單核苷酸多樣性跟array CGH，array CGH跟CGH有什麼差別嗎？ 最主要array CGH在英國牛津大學1999年的達跟威爾斯他提到，如果使用array CGH，它是用檢查的DNA跟正常的DNA去競合， 用電腦分析會看出不整倍，是多套體還是單套體， 所以說array CGH它有五個優點： 1.染色體24個全部看到， 2.24小時有報告， 3.不需要抽血不孕症夫妻的血去做探針， 4.全球有超過15000個病人使用array CGH來診斷智障，即便是第三天胚胎切片用Fish跟array CGH做交叉比對，發現array CGH準確很多， 所以說array CGH經過驗證， 會發現發不出報告的比例第三天大概為2%， 第五天則不到2%，所以我們可以這樣說， 第五天胚胎切片做array CGH或第三天做CGH， 誤診率大概為1.8%，不到2%，這就是歐洲生殖醫學會常常唸在嘴邊的2%錯誤率， 第五天囊胚進行array CGH的好處有： 1.拿到檢體比較多，看得比較準確， 2.比較不會相鑲， 3.錯誤率只有1.8%， 4.第五天切片比較不會傷到胚胎，壞處是能夠切片的不多， 可以讓我們更有勇氣做單一胚胎植入，因為胚胎染色體正常，同時我們冷凍胚胎再植入，這時候子宮內膜是比較穩定的，有一份研究2009年在生育與節育期刋， 他們提到在經由胚胎切片之後，會有比較高的繼續懷孕率，那array CGH在囊胚期切片的臨床成績，在一份研究平均病人37.7歲，至少曾經有過2.4次的試管嬰兒失敗 ，可以取到6.4顆的囊胚，切片下去有52%是染色體正常，48%是染色體不正常，經過冷凍再解凍，胚胎存活率為93%， 胚胎切片之後冷凍再解凍的前趨報告，有一個報告是45個週期， 平均37.7歲， 切片之後植入確定染色體正常， 胚胎著床率是67%可以看到胚囊， 繼續懷孕率為79%， 換言之，他們每一次是植入兩個胚胎， 著床率67%， 繼續懷孕率79%， 但反觀不做切片， 植入大約三個胚胎，著床率只有28%， 繼續懷孕率只有60%，差很多，有做切片， 比如30~34歲， 胚胎的染色體正常有一半50%， 有做切片再植入，著床率是70%，如果34~45歲，雖然染色體不正常高達80%， 如果有做胚胎切片，著床率也是70%，所有的年紀， 不管年紀輕的、年紀大的，只要有做切片， 每個著床率都有七成，重點不在於年紀，重點在於染色體正不正常，所以我們做前趨報告的結論有： 1.在所有的年紀經過胚胎切片，只要染色體正常，它的懷孕率都非常的高，著床率為70%，懷孕率73%左右 2.在年紀大的這個族群，因為可能取卵數少，或沒辦法取卵，或切片下去沒有正常染色體的胚胎，所以整體來說，算懷孕率它還是比較低，因為可能做出來的產品不夠多或沒有染 色體正常的胚胎可以植入， 3.如果年紀大的已找出染色體正常的胚胎，還是跟年輕一樣的有73%的著床率， 4.只要植入染色體正常的胚胎，自然流產的比例會很低，因此做胚胎切片、做染色體分析， 還是存在四個問題還沒有解決： 1.這麼好的成績是用隨機臨床對比研究嗎？ 2.植入是冷凍胚胎，本來冷凍胚胎成功率就比較高，成功率高是冷凍胚胎的因素呢？還是染色體的因素？ 3.當然試管嬰兒的成功或失敗，可以用胚胎染色體來解釋，可是媽媽的年紀大，會不會影響胚胎在子宮著床的可能性？ 4.難道所有的病人都可以在胚胎切片得到全面的好處嗎？ 對於染色體平衡轉位，用PGD來做檢查，又怎麼樣？ 我們知道平衡轉位很容易流產， 如果用array CGH還是可以找出來， 比如說我們array CGH跟SNP來對比， SNP它有30萬個探針， array CGH有4000個探針， 可是 array CGH探針的大小有15萬kb， SNP只有50 kb， 這樣相乘我們得到array CGH基因可以包含微百分之二十五， 就是600個mb，SNP共有1.5mb，也就是它能夠涵蓋的染色體就只有0.1左右，所以這就會造成所謂的解像力， 哪一種解像力比較好，哪一種就會被使用，國內發展的主流仍然在 array CGH、qPCR跟未來的次世代定序，因此如果我們把胚胎分析9~12個探針， 用多樣性去分析占8%， 我們會發現沒有辦法用arrat CGH去診斷的比例為1.5%，也就是說會有1.8個會被告知很抱歉，沒有結果，相較於用螢光原位雜交染色法看12個探針， CGH、array CGH、SNP，如果從速度、費用、解像力來說， 仍然以array CGH來說較優，臨床上較佳，對於單基因疾病用24個染色體來看的話，只要知道斷點在哪裡，幾乎所有基因的疾病都可以看， 包括多囊腎臟、周邊肌肉萎縮症CMT等等，這都已經有人做出來了， 我們都知道在傳統去做單基因疾病，通常比較擔心的是有一個ADO的缺陷，這ADO一旦產生就會診斷錯誤， 如果是使用SNP去診斷單基因疾病就比較不會出差錯，所以做出一個結論就是： 1.染色體的不正常是隨著年紀的增加而增加，看胚胎要看病人的年紀，年紀越大越容易產生染色體異常， 2.胚胎的形狀、碎片、發育的停頓也代表胚胎染色體異常， 3.很令人傷心的是: 超過35歲以上，胚胎好到不行，也不到一半以上胚胎染色體正常，而且看起很漂亮的囊胚， 不到60%是染色體正常，因此我們如果可以選到染色體正常的胚胎，來改善試管嬰兒成功率，是合邏輯的想法， 目前正在進行的研究當中，包括做囊胚期切片，其實不會影響胚胎的品質， 也就是不會讓胚胎受傷， 錯誤率只有1.8%， 可以分析15、16、21、22的染色體， 如果再加上四個以上更好， 再來更希望的是切片要更熟練才不會傷到胚胎，或採的樣本數不多， 另外不是每個人都可以切片，至少要有5個胚胎， 最好針對35歲來做會比較好，囊胚期胚胎切片做CGH冷凍胚胎等待報告， 目前是認為成績最好的，平均胚胎著床率為72%，即便是38歲， 第二個囊胚期胚胎切片進行array CGH，一樣可以得到相同的結果， 第三天胚胎切片去做array CGH可能會傷到胚胎， 也許胚胎冷凍再解凍， 子宮內膜會比較適合著床，又可以增加胚胎著床率， 若單基因疾病要檢查出來，又要看24個染色體，那病人要做兩次切片或NGS，而且需抽夫妻的血來做基因探針，也就是所謂的前測。